Ανοσοφαινότυπος Τ λεμφοκυττάρων σε πειραματικό μοντέλο πολλαπλής σκλήρυνσης

Abstract

Η πολλαπλή σκλήρυνση (ΠΣ) είναι μία χρόνια, φλεγμονώδης και αυτοάνοση νόσος του κεντρικού νευρικού συστήματος (ΚΝΣ), που δυσχεραίνει τη λειτουργικότητα των ασθενών λόγω κινητικής και αισθητηριακής δυσλειτουργίας. Παρά το πλήθος των ευρημάτων δεν είναι γνωστά τα αίτια της ασθένειας με αποτέλεσμα να μην υπάρχει θεραπεία της νόσου. Γενετικοί, επιγενετικοί και περιβαλλοντικοί παράγοντες έχουν συσχετιστεί με τη συχνότητα εμφάνισης της νόσου, η οποία θεωρείται Τ λεμφοκυτταρικά διαμεσολαβούμενη και χαρακτηρίζεται από χρόνια φλεγμονή, απομυελίνωση, νευροεκφύλιση και γνωστικά ελλείμματα. Ο άξονας γαστρεντερικού-εγκεφάλου αφορά στην επικοινωνία των δύο συστημάτων και την επίδραση του ενός στο άλλο τόσο κατά την τυπική ανάπτυξη αλλά και την παθολογική. Το ελικοβακτηρίδιο του πυλωρού (ΕΠ) είναι ένα κοινός παθογόνος οργανισμός του γαστρικού βλεννογόνου και επιδημιολογικά έχει συσχετιστεί με πλήθος νοσημάτων, περιλαμβανομένων και ασθενειών του κεντρικού νευρικού συστήματος. Το πιο ευρύτερα διαδεδομένο πειραματικό μοντέλο μελέτης της πολλαπλής σκλήρυνσης στα πειραματόζωα είναι το μοντέλο Πειραματικής Αυτοάνοσης Εγκεφαλομυελίτιδας (ΠΑΕ). Σκοπός της παρούσας διπλωματικής εργασίας είναι η μελέτη του ανοσοφαινοτύπου των Τ λεμφοκυττάρων σε ποντίκια στα οποία χορηγήθηκε ΕΠ και έπειτα ανοσοποιήθηκαν με MOG33-55. Η ιδέα βασίζεται σε δεδομένα μελετών που υποστηρίζουν τον ρυθμιστικό φαινότυπο του ελικοβακτηριδίου στα ανοσοποιημένα πειραματόζωα. Η κύρια τεχνική ανάλυσης δεδομένων είναι η κυτταρομετρία ροής, όπου και χρησιμοποιήθηκαν ενδοκυττάριοι και επιφανειακοί δείκτες για να καθοριστεί ο φαινότυπος των CD4+ Τ κυττάρων τη δέκατη μέρα μετά την ανοσοποίηση. Ο χρονικός καθορισμός συλλογής των ιστών σηματοδοτεί την ολοκλήρωση της αντιγονοπαρουσίασης στην περιφέρεια σύμφωνα με το μοντέλο της ΠΑΕ. Το πείραμα αποτελεί μέρος ενός ευρύτερου ερευνητικού προγράμματος της Δρ. Μαρίνας Κλεοπάτρας Μποζίκη και διεξήχθη στο σύνολό του στο Εργαστήριο Πειραματικής Νευρολογίας και Νευροανοσολογίας στο Γενικό Πανεπιστημιακό Νοσοκομείο Θεσσαλονίκης, ΑΧΕΠΑ. Μέρος της παρούσας εργασίας ήταν και η ποσοτική ανάλυση της μικρογλοίας σε περιοχές του κεντρικού νευρικού συστήματος με ανοσοφθορισμό με τη χρήση δεικτών μικρογλοίας έναντι Μ1 και Μ2 φαινοτύπων τη 20η ημέρα μετά την ανοσοποίηση.